De Chinese Farmacopee (editie 2020) vereist dat het methanolextract van YCH niet minder dan 20,0% mag zijn [2], zonder dat er andere kwaliteitsevaluatie-indicatoren zijn gespecificeerd. De resultaten van dit onderzoek laten zien dat de inhoud van de methanolextracten van de wilde en gecultiveerde monsters beide voldeden aan de farmacopee-norm, en dat er geen significant verschil tussen beide bestond. Volgens die index was er dus geen duidelijk kwaliteitsverschil tussen wilde en gecultiveerde monsters. De gehalten aan totale sterolen en totale flavonoïden in de wilde monsters waren echter aanzienlijk hoger dan die in de gekweekte monsters. Verdere metabolomische analyse onthulde een overvloedige diversiteit aan metabolieten tussen de wilde en gecultiveerde monsters. Bovendien werden 97 significant verschillende metabolieten uitgescreend, die worden vermeld in deAanvullende tabel S2. Tot deze significant verschillende metabolieten behoren β-sitosterol (ID is M397T42) en quercetinederivaten (M447T204_2), waarvan is gemeld dat ze actieve ingrediënten zijn. Niet eerder gerapporteerde bestanddelen, zoals trigonelline (M138T291_2), betaïne (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenon (M241T189), arctiïne (M557T165) en loganzuur (M399T284_2), werden ook tot de differentiële metabolieten gerekend. Deze componenten spelen verschillende rollen bij de anti-oxidatie, ontstekingsremmende werking, het wegvangen van vrije radicalen, de bestrijding van kanker en de behandeling van atherosclerose en zouden daarom vermoedelijk nieuwe actieve componenten in YCH kunnen vormen. Het gehalte aan actieve ingrediënten bepaalt de werkzaamheid en kwaliteit van de medicinale materialen [7]. Samenvattend heeft methanolextract als de enige YCH-kwaliteitsevaluatie-index enkele beperkingen, en meer specifieke kwaliteitsmarkers moeten verder worden onderzocht. Er waren significante verschillen in totale sterolen, totale flavonoïden en de inhoud van vele andere differentiële metabolieten tussen wilde en gecultiveerde YCH; er waren dus mogelijk enkele kwaliteitsverschillen tussen hen. Tegelijkertijd zouden de nieuw ontdekte potentiële actieve ingrediënten in YCH een belangrijke referentiewaarde kunnen hebben voor de studie van de functionele basis van YCH en de verdere ontwikkeling van YCH-hulpbronnen.
Het belang van echte medicinale materialen wordt in de specifieke regio van herkomst al lang erkend voor de productie van Chinese kruidengeneesmiddelen van uitstekende kwaliteit [
8]. Hoge kwaliteit is een essentieel kenmerk van echte medicinale materialen, en de leefomgeving is een belangrijke factor die de kwaliteit van dergelijke materialen beïnvloedt. Sinds YCH als medicijn werd gebruikt, wordt het lange tijd gedomineerd door wilde YCH. Na de succesvolle introductie en domesticatie van YCH in Ningxia in de jaren tachtig verschoof de bron van medicinale materialen uit Yinchaihu geleidelijk van wilde naar gecultiveerde YCH. Volgens een eerder onderzoek naar YCH-bronnen [
9] en het veldonderzoek van onze onderzoeksgroep zijn er significante verschillen in de verspreidingsgebieden van de gecultiveerde en wilde medicinale materialen. De wilde YCH wordt voornamelijk verspreid in de autonome regio Ningxia Hui van de provincie Shaanxi, grenzend aan de droge zone van Binnen-Mongolië en centraal Ningxia. Met name de woestijnsteppe in deze gebieden is de meest geschikte habitat voor YCH-groei. Daarentegen wordt de gecultiveerde YCH voornamelijk gedistribueerd in het zuiden van het wilde verspreidingsgebied, zoals Tongxin County (Cultivated I) en de omliggende gebieden, die de grootste teelt- en productiebasis in China zijn geworden, en Pengyang County (Cultivated II). , dat in een zuidelijker gebied ligt en een ander productiegebied is voor de gecultiveerde YCH. Bovendien zijn de habitats van de bovengenoemde twee gecultiveerde gebieden geen woestijnsteppe. Daarom zijn er naast de productiewijze ook aanzienlijke verschillen in de habitat van de wilde en gecultiveerde YCH. Habitat is een belangrijke factor die de kwaliteit van kruidenmedicijnen beïnvloedt. Verschillende habitats zullen de vorming en accumulatie van secundaire metabolieten in de planten beïnvloeden, waardoor de kwaliteit van geneesmiddelen wordt aangetast [
10,
11]. Daarom kunnen de significante verschillen in het gehalte aan totale flavonoïden en totale sterolen en de expressie van de 53 metabolieten die we in dit onderzoek hebben gevonden het resultaat zijn van verschillen in veldbeheer en habitat.
Een van de belangrijkste manieren waarop de omgeving de kwaliteit van medicinale materialen beïnvloedt, is door stress uit te oefenen op de bronplanten. Matige omgevingsstress heeft de neiging de accumulatie van secundaire metabolieten te stimuleren [
12,
13]. De groei/differentiatiebalanshypothese stelt dat planten voornamelijk groeien als er voldoende voedingsstoffen aanwezig zijn, terwijl planten bij een tekort aan voedingsstoffen vooral differentiëren en meer secundaire metabolieten produceren.
14]. Droogtestress veroorzaakt door watergebrek is de belangrijkste milieustress waarmee planten in droge gebieden te maken krijgen. In deze studie is de waterconditie van de gecultiveerde YCH overvloediger, met jaarlijkse neerslagniveaus die aanzienlijk hoger zijn dan die voor de wilde YCH (de watervoorziening voor Cultivated I was ongeveer 2 keer die van Wild; Cultivated II was ongeveer 3,5 keer die van Wild ). Daarnaast is de bodem in de wilde omgeving zandgrond, maar de bodem in de landbouwgrond is kleigrond. Vergeleken met klei heeft zandgrond een slecht waterretentievermogen en is de kans groter dat droogtestress verergert. Tegelijkertijd ging het teeltproces vaak gepaard met water geven, waardoor de mate van droogtestress laag was. Wilde YCH groeit in barre, natuurlijke, dorre habitats en kan daarom te lijden hebben onder ernstigere droogtestress.
Osmoregulatie is een belangrijk fysiologisch mechanisme waarmee planten omgaan met droogtestress, en alkaloïden zijn belangrijke osmotische regulatoren in hogere planten.
15]. Betaïnes zijn in water oplosbare alkaloïde quaternaire ammoniumverbindingen en kunnen als osmoprotectanten werken. Droogtestress kan het osmotische potentieel van cellen verminderen, terwijl osmoprotectanten de structuur en integriteit van biologische macromoleculen behouden en behouden, en effectief de schade verlichten die door droogtestress aan planten wordt veroorzaakt.
16]. Onder droogtestress nam het betaïnegehalte van suikerbieten en Lycium barbarum bijvoorbeeld aanzienlijk toe [
17,
18]. Trigonelline is een regulator van de celgroei en kan onder droogtestress de lengte van de celcyclus van planten verlengen, de celgroei remmen en tot krimp van het celvolume leiden. De relatieve toename van de concentratie opgeloste stoffen in de cel stelt de plant in staat osmotische regulatie te bereiken en zijn vermogen om droogtestress te weerstaan te vergroten.
19]. JIA X [
20] ontdekte dat, met een toename van droogtestress, Astragalus membranaceus (een bron van traditionele Chinese geneeskunde) meer trigonelline produceerde, dat werkt om het osmotische potentieel te reguleren en het vermogen om droogtestress te weerstaan te verbeteren. Er is ook aangetoond dat flavonoïden een belangrijke rol spelen bij de weerstand van planten tegen droogtestress [
21,
22]. Een groot aantal onderzoeken heeft bevestigd dat matige droogtestress bevorderlijk was voor de accumulatie van flavonoïden. Lang Duo-Yong et al. [
23] vergeleek de effecten van droogtestress op YCH door de wateropslagcapaciteit in het veld te beheersen. Er werd vastgesteld dat droogtestress de groei van wortels tot op zekere hoogte remde, maar bij matige en ernstige droogtestress (40% veldwaterhoudend vermogen) nam het totale flavonoïdengehalte in YCH toe. Ondertussen kunnen fytosterolen, onder droogtestress, de vloeibaarheid en permeabiliteit van het celmembraan reguleren, het waterverlies remmen en de stressbestendigheid verbeteren.
24,
25]. Daarom kan de verhoogde accumulatie van totale flavonoïden, totale sterolen, betaïne, trigonelline en andere secundaire metabolieten in wilde YCH verband houden met droogtestress met hoge intensiteit.
In deze studie werd een KEGG-routeverrijkingsanalyse uitgevoerd op de metabolieten waarvan werd vastgesteld dat ze significant verschilden tussen de wilde en gecultiveerde YCH. Tot de verrijkte metabolieten behoorden de metabolieten die betrokken zijn bij de routes van het ascorbaat- en aldaraatmetabolisme, de aminoacyl-tRNA-biosynthese, het histidinemetabolisme en het bèta-alaninemetabolisme. Deze metabolische routes zijn nauw verwant aan de stressresistentiemechanismen van planten. Onder hen speelt het ascorbaatmetabolisme een belangrijke rol bij de productie van antioxidanten in planten, het koolstof- en stikstofmetabolisme, stressbestendigheid en andere fysiologische functies.
26]; aminoacyl-tRNA-biosynthese is een belangrijke route voor eiwitvorming [
27,
28], dat betrokken is bij de synthese van stressbestendige eiwitten. Zowel histidine- als β-alanine-routes kunnen de planttolerantie voor omgevingsstress verbeteren [
29,
30]. Dit geeft verder aan dat de verschillen in metabolieten tussen wilde en gecultiveerde YCH nauw verband hielden met de processen van stressresistentie.
De bodem is de materiële basis voor de groei en ontwikkeling van geneeskrachtige planten. Stikstof (N), fosfor (P) en kalium (K) in de bodem zijn belangrijke voedingselementen voor de groei en ontwikkeling van planten. Het organische materiaal in de bodem bevat ook N, P, K, Zn, Ca, Mg en andere macro-elementen en sporenelementen die nodig zijn voor geneeskrachtige planten. Overmatige of tekortschietende voedingsstoffen, of onevenwichtige voedingsstoffenverhoudingen, zullen de groei en ontwikkeling en de kwaliteit van medicinale materialen beïnvloeden, en verschillende planten hebben verschillende voedingsbehoeften.
31,
32,
33]. Een lage N-stress bevorderde bijvoorbeeld de synthese van alkaloïden in Isatis indigotica en was gunstig voor de accumulatie van flavonoïden in planten zoals Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge en Dichondra repens Forst. Daarentegen remde te veel N de accumulatie van flavonoïden bij soorten als Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis en Ginkgo biloba, en beïnvloedde de kwaliteit van medicinale materialen [
34]. De toepassing van P-meststof was effectief bij het verhogen van het gehalte aan glycyrrhizinezuur en dihydroaceton in Ural-drop [
35]. Wanneer de toegediende hoeveelheid de 0,12 kg·m−2 overschreed, nam het totale flavonoïdengehalte in Tussilago farfara af [
36]. De toepassing van een P-meststof had een negatief effect op het gehalte aan polysachariden in de traditionele Chinese geneeskunde rhizoma polygonati [
37], maar een K-meststof was effectief in het verhogen van het gehalte aan saponinen [
38]. Het toepassen van 450 kg·hm−2 K kunstmest was het beste voor de groei en saponineaccumulatie van de twee jaar oude Panax notoginseng [
39]. Onder de verhouding N:P:K = 2:2:1 waren de totale hoeveelheden hydrothermisch extract, harpagide en harpagoside het hoogst [
40]. De hoge verhouding N, P en K was gunstig voor het bevorderen van de groei van Pogostemon cablin en het verhogen van het gehalte aan vluchtige olie. Een lage verhouding N, P en K verhoogde het gehalte aan de belangrijkste effectieve componenten van Pogostemon cablin-stengelbladolie [
41]. YCH is een plant die dorre grond verdraagt en mogelijk specifieke eisen stelt aan voedingsstoffen zoals N, P en K. In dit onderzoek was de grond van de wilde YCH-planten, vergeleken met gecultiveerd YCH, relatief dor: de bodeminhoud van de organische stof waren totaal N, totaal P en totaal K respectievelijk ongeveer 1/10, 1/2, 1/3 en 1/3 van die van de gecultiveerde planten. Daarom kunnen de verschillen in bodemvoedingsstoffen een andere reden zijn voor de verschillen tussen de metabolieten die worden gedetecteerd in de gecultiveerde en wilde YCH. Weibao Ma et al. [
42] ontdekte dat de toepassing van een bepaalde hoeveelheid N-meststof en P-meststof de opbrengst en kwaliteit van zaden aanzienlijk verbeterde. Het effect van voedingselementen op de kwaliteit van YCH is echter niet duidelijk, en bemestingsmaatregelen om de kwaliteit van medicinale materialen te verbeteren moeten verder worden onderzocht.
Chinese kruidengeneesmiddelen hebben de kenmerken van “Gunstige habitats bevorderen de opbrengst, en ongunstige habitats verbeteren de kwaliteit” [
43]. In het proces van een geleidelijke verschuiving van wilde naar gecultiveerde YCH veranderde de habitat van de planten van de dorre en dorre woestijnsteppe naar vruchtbare landbouwgrond met meer overvloedig water. Het leefgebied van de gecultiveerde YCH is superieur en de opbrengst is hoger, wat helpt om aan de marktvraag te voldoen. Deze superieure habitat leidde echter tot significante veranderingen in de metabolieten van YCH; Of dit bevorderlijk is voor het verbeteren van de kwaliteit van YCH en hoe een hoogwaardige productie van YCH kan worden bereikt door middel van op wetenschap gebaseerde teeltmaatregelen zal verder onderzoek vergen.
Simulatieve habitatteelt is een methode om de habitat- en omgevingsomstandigheden van wilde geneeskrachtige planten te simuleren, gebaseerd op kennis van de langetermijnaanpassing van de planten aan specifieke omgevingsstress.
43]. Door verschillende omgevingsfactoren te simuleren die de wilde planten beïnvloeden, vooral de oorspronkelijke habitat van planten die worden gebruikt als bronnen van authentieke medicinale materialen, maakt de aanpak gebruik van wetenschappelijk ontwerp en innovatief menselijk ingrijpen om de groei en het secundaire metabolisme van Chinese geneeskrachtige planten in evenwicht te brengen.
43]. De methode heeft tot doel om optimale afspraken te maken over de ontwikkeling van hoogwaardige medicinale materialen. Simulatieve habitatteelt zou een effectieve manier moeten bieden voor de hoogwaardige productie van YCH, zelfs als de farmacodynamische basis, kwaliteitsmarkers en reactiemechanismen op omgevingsfactoren onduidelijk zijn. Dienovereenkomstig stellen wij voor dat wetenschappelijke ontwerp- en veldbeheermaatregelen bij de teelt en productie van YCH moeten worden uitgevoerd met verwijzing naar de milieukenmerken van wilde YCH, zoals dorre, dorre en zandige bodemomstandigheden. Tegelijkertijd wordt ook gehoopt dat onderzoekers diepgaander onderzoek zullen doen naar de functionele materiaalbasis en kwaliteitsmarkers van YCH. Deze onderzoeken kunnen effectievere evaluatiecriteria voor YCH opleveren en de hoogwaardige productie en duurzame ontwikkeling van de industrie bevorderen.