Pure Saposhnikovia divaricata-olie voor het maken van kaarsen en zeep, groothandel etherische olie voor diffusers, nieuw voor diffusers voor rietbranders

Pure Saposhnikovia divaricata-olie voor het maken van kaarsen en zeep, groothandel diffuser essentiële olie nieuw voor diffusers voor rietbranders Uitgelichte afbeelding

korte beschrijving:

2.1. Voorbereiding van SDE

De wortelstokken van SD werden als gedroogd kruid gekocht bij Hanherb Co. (Guri, Korea). De plantaardige materialen werden taxonomisch bevestigd door Dr. Go-Ya Choi van het Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). Een voucher-exemplaar (nummer 2014 SDE-6) werd gedeponeerd in het Korean Herbarium of Standard Herbal Resources. Gedroogde wortelstokken van SD (320 g) werden tweemaal geëxtraheerd met 70% ethanol (met 2 uur refluxen) en het extract werd vervolgens onder verlaagde druk geconcentreerd. Het afkooksel werd gefiltreerd, gelyofiliseerd en bewaard bij 4°C. De opbrengst aan gedroogd extract uit ruwe uitgangsmaterialen was 48,13% (w/w).

2.2. Kwantitatieve analyse van vloeistofchromatografie (HPLC) met hoge prestaties

Chromatografische analyse werd uitgevoerd met een HPLC-systeem (Waters Co., Milford, MA, VS) en een fotodiode-arraydetector. Voor de HPLC-analyse van SDE is de primaireO-glucosylcimifugin-standaard werd gekocht van het Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea), ensec-O-glucosylhamaudol en 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol werden in ons laboratorium geïsoleerd en geïdentificeerd door spectrale analyses, voornamelijk door middel van NMR en MS.

SDE-monsters (0,1 mg) werden opgelost in 70% ethanol (10 ml). Chromatografische scheiding werd uitgevoerd met een XSelect HSS T3 C18-kolom (4,6 x 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, VS). De mobiele fase bestond uit acetonitril (A) en 0,1% azijnzuur in water (B) met een stroomsnelheid van 1,0 ml/min. Een meerstapsgradiëntprogramma werd als volgt gebruikt: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min) en 20–65% A (23–40 min). ). De detectiegolflengte werd gescand bij 210-400 nm en opgenomen bij 254 nm. Het injectievolume was 10,0μL. Standaardoplossingen voor de bepaling van drie chromonen werden bereid met een eindconcentratie van 7,781 mg/ml (primairO-glucosylcimifugin), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol) en 31,125 mg/ml (sec-O-glucosylhamaudol) in methanol en op 4°C gehouden.

2.3. Evaluatie van ontstekingsremmende activiteitIn vitro

2.3.1. Celcultuur en monsterbehandeling

RAW 264.7-cellen werden verkregen van de American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, VS) en gekweekt in DMEM-medium dat 1% antibiotica en 5,5% FBS bevatte. Cellen werden geïncubeerd in een bevochtigde atmosfeer van 5% CO2 bij 37°C. Om de cellen te stimuleren werd het medium vervangen door vers DMEM-medium en lipopolysacharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, VS) op 1 uur.μg/ml werd toegevoegd in aanwezigheid of afwezigheid van SDE (200 of 400μg/ml) gedurende nog eens 24 uur.

2.3.2. Bepaling van stikstofmonoxide (NO), prostaglandine E2 (PGE2), tumornecrosefactorα(TNF-α), en productie van interleukine-6 (IL-6).

Cellen werden behandeld met SDE en 24 uur gestimuleerd met LPS. NO-productie werd geanalyseerd door nitriet te meten met behulp van het Griess-reagens volgens een eerder onderzoek [12]. Uitscheiding van de inflammatoire cytokines PGE2, TNF-αen IL-6 werd bepaald met behulp van een ELISA-kit (R&D-systemen) volgens de instructies van de fabrikant. De effecten van SDE op NO- en cytokineproductie werden bepaald bij 540 nm of 450 nm met behulp van een Wallac EnVision™microplaatlezer (PerkinElmer).

2.4. Evaluatie van anti-artrose-activiteitIn leven

2.4.1. Dieren

Mannelijke Sprague-Dawley-ratten (7 weken oud) werden gekocht bij Samtako Inc. (Osan, Korea) en gehuisvest onder gecontroleerde omstandigheden met een licht/donkercyclus van 12 uur bij°C en% vochtigheid. Ratten werden voorzien van een laboratoriumdieet en waterad libitum. Alle experimentele procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de National Institutes of Health (NIH) en goedgekeurd door het Animal Care and Use Committee van de Daejeon-universiteit (Daejeon, republiek Korea).

2.4.2. Inductie van OA met MIA bij ratten

De dieren werden vóór aanvang van het onderzoek gerandomiseerd en toegewezen aan behandelingsgroepen (per groep). MIA-oplossing (3 mg/50μL 0,9% zoutoplossing) werd direct geïnjecteerd in de intra-articulaire ruimte van de rechterknie onder anesthesie geïnduceerd met een mengsel van ketamine en xylazine. Ratten werden willekeurig in vier groepen verdeeld: (1) de zoutoplossinggroep zonder MIA-injectie, (2) de MIA-groep met MIA-injectie, (3) de met SDE behandelde groep (200 mg/kg) met MIA-injectie, en (4 ) de met indomethacine (IM-) behandelde groep (2 mg/kg) met MIA-injectie. Ratten kregen oraal SDE en IM toegediend, 1 week vóór MIA-injectie gedurende 4 weken. De dosering van SDE en IM die in dit onderzoek werd gebruikt, was gebaseerd op de doseringen die in eerdere onderzoeken werden gebruikt [10,13,14].

2.4.3. Metingen van de gewichtsverdeling van de achterpoot

Na OA-inductie was het oorspronkelijke evenwicht in het draagvermogen van de achterpoten verstoord. Een onvermogenstester (Linton-instrumentatie, Norfolk, VK) werd gebruikt om veranderingen in de draagtolerantie te evalueren. Ratten werden zorgvuldig in de meetkamer geplaatst. De door het achterbeen uitgeoefende gewichtdragende kracht werd gemiddeld over een periode van 3 seconden. De gewichtsverdelingsverhouding werd berekend met de volgende vergelijking: [gewicht op rechter achterpoot/(gewicht op rechter achterpoot + gewicht op linker achterpoot)] × 100 [15].

2.4.4. Metingen van serumcytokineniveaus

De bloedmonsters werden gedurende 10 minuten bij 4°C bij 1.500 g gecentrifugeerd; vervolgens werd het serum verzameld en tot gebruik bij -70°C bewaard. De niveaus van IL-1β, IL-6, TNF-αen PGE2 in het serum werden gemeten met behulp van ELISA-kits van R&D Systems (Minneapolis, MN, VS) volgens de instructies van de fabrikant.

2.4.5. Realtime kwantitatieve RT-PCR-analyse

Totaal RNA werd geëxtraheerd uit kniegewrichtsweefsel met behulp van het TRI reagens® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, VS), omgekeerd getranscribeerd in cDNA en PCR-geamplificeerd met behulp van een TM One Step RT PCR-kit met SYBR groen (Applied Biosystems , Grand Island, NY, VS). Real-time kwantitatieve PCR werd uitgevoerd met behulp van het Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-systeem (Applied Biosystems, Grand Island, NY, VS). De primersequenties en de probesequentie worden in Tabel getoond1. Porties van monster-cDNA's en een gelijke hoeveelheid GAPDH-cDNA werden geamplificeerd met het TaqMan® Universal PCR-mastermengsel dat DNA-polymerase bevat volgens de instructies van de fabrikant (Applied Biosystems, Foster, CA, VS). PCR-omstandigheden waren 2 minuten bij 50°C, 10 minuten bij 94°C, 15 seconden bij 95°C en 1 minuut bij 60°C gedurende 40 cycli. De concentratie van het doelgen werd bepaald met behulp van de vergelijkende Ct-methode (drempelcyclusnummer op het kruispunt tussen amplificatiegrafiek en drempel), volgens de instructies van de fabrikant.

FOB-prijs:US $ 0,5 - 9.999 / stuk

Min. bestelhoeveelheid:100 Stuk/stukken

Leveringscapaciteit:10000 Stuk/Stukken per Maand

Stuur een e-mail naar ons

Productdetail

Producttags

Artrose (OA) is de meest voorkomende aandoening van het bewegingsapparaat en de meest voorkomende degeneratieve gewrichtsziekte bij ouderen.1]. OA is een aandoening die gedeeltelijk wordt veroorzaakt door letsel, verlies van de structuur en functie van het kraakbeen en ontregeling van pro-inflammatoire en ontstekingsremmende routes.2,3]. Het tast voornamelijk het gewrichtskraakbeen en het subchondrale bot van synoviale gewrichten aan en resulteert in gewrichtsfalen, wat leidt tot pijn bij het dragen van gewicht, inclusief lopen en staan.4].

Er is geen remedie voor artrose, omdat het erg moeilijk is om het kraakbeen te herstellen als het eenmaal is vernietigd [5]. De doelstellingen van de behandeling zijn het verlichten van pijn, het behouden of verbeteren van de gewrichtsmobiliteit, het vergroten van de sterkte van de gewrichten en het minimaliseren van de invaliderende effecten van de ziekte. Farmacologische behandelingen van artrose zijn gericht op het verminderen van pijn om de gewrichtsfunctie en kwaliteit van leven van de patiënt te verbeteren. Hoewel de vernietiging van kraakbeen de belangrijkste gebeurtenis is bij artrose, is de afbraak van collageen het fundamentele incident dat de onomkeerbare progressie van artrose in combinatie met ontstekingen bepaalt.6,7]. Van behandelingen met ontstekingsremmende en chondroprotectieve activiteit wordt verwacht dat ze de pijn verlichten en de matrixintegriteit bij artrosepatiënten behouden.

Daarom zal het verminderen van ontstekingen waarschijnlijk gunstig zijn bij de behandeling van artrose. Recente studies suggereren een beschermende rol voor kruidenbronnen bij de progressie van artrose, in termen van het verzachten van chondrocytenontsteking en verdere vernietiging van kraakbeen, door hun vermogen om te interageren met gewrichtsgerelateerde weefsels, resulterend in de verlichting van gewrichtspijn.8].

De wortel vanSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) wordt in de traditionele geneeskunde veel gebruikt voor de behandeling van hoofdpijn, pijn, ontstekingen en artritis in Korea en China.9,10]. De diverse farmacologische effecten vanSaposhnikovia divaricata(SD) omvatten ook ontstekingsremmende, pijnstillende, koortswerende en antiartritische eigenschappen [9,11]. Een recente studie heeft aangetoond dat SD-chromonextract potentiële antireumatoïde artritis-effecten bezit in een muismodel van collageen-geïnduceerde artritis [10]; Er zijn echter weinig onderzoeken uitgevoerd ter ondersteuning van de ontstekingsremmende en antiartritisactiviteit vanSaposhnikovia divaricatauittreksel (SDE).

Daarom onderzocht de huidige studie de ontstekingsremmende en anti-artrose-activiteiten van een 70% ethanolextract van SD. Eerst werd het ontstekingsremmende effect van SDE geëvalueerdin vitroin door LPS geïnduceerde RAW 264.7-cellen. Vervolgens werd het anti-artrose-effect van SDE gemeten door het beoordelen van de gewichtsdragende verdeling, de afbraak van gewrichtskraakbeen en ontstekingsreacties in een rattenmodel van door mononatriumjoodacetaat (MIA) geïnduceerde OA.