-
Aromatherapie Pure Natuurlijke Eucalyptusblad etherische olie voor huid- en lichaamsverzorging
Extractie- of verwerkingsmethode: stoomdestillatie
Destillatie Extractiedeel: blad
Oorsprong van het land: China
Toepassing: Diffuus/aromatherapie/massage
Houdbaarheid: 3 jaar
Aangepaste service: aangepast label en doos of volgens uw vereisten
Certificering: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Eucalyptusolie reageert met slijm en maakt het los, wat direct verlichting biedt bij kortademigheid en andere ademhalingsproblemen. Het is krachtig genoeg om te werken als insectenwerend middel. Bij gebruik in aromatherapie zorgt het voor helderheid van geest. De therapeutische voordelen zijn te danken aan de antimicrobiële, antibacteriële, antiseptische, krampstillende en antivirale eigenschappen. Gebruik eucalyptusolie bij diverse huid- en gezondheidsproblemen. Het bevat eucalyptol, ook wel bekend als cineol. Deze stof ondersteunt uw algehele gezondheid en welzijn.
-
Natuurlijke pure biologische lavendel etherische olie voor aromatherapie huidverzorging
Extractie- of verwerkingsmethode: stoomdestillatie
Destillatie-extractiedeel: Bloem
Oorsprong van het land: China
Toepassing: Diffuus/aromatherapie/massage
Houdbaarheid: 3 jaar
Aangepaste service: aangepast label en doos of volgens uw vereisten
Certificering: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% pure natuurlijke biologische Magnoliae Officmalis Cortex-olie etherische olie voor huidverzorging
De geur van Hou Po is eerst bitter en scherp, maar opent geleidelijk met een diepe, stroperige zoetheid en warmte.
Hou Po heeft affiniteit met de elementen Aarde en Metaal, waar de bittere warmte een sterke werking heeft op de qi-afname en droge vochtigheid. Vanwege deze eigenschappen wordt het in de Chinese geneeskunde gebruikt om stagnatie en ophoping in het spijsverteringskanaal te verlichten, evenals hoest en piepende ademhaling door slijm dat de longen verstopt.
Magnolia Officinials is een bladverliezende boom die oorspronkelijk voorkomt in de bergen en valleien van Sichuan, Hubei en andere provincies in China. De zeer aromatische schors, die in de traditionele Chinese geneeskunde wordt gebruikt, wordt van de stengels, takken en wortels verwijderd. De oogst vindt plaats van april tot juni. De dikke, gladde schors, rijk aan olie, heeft een paarsachtige kleur aan de binnenkant met een kristalachtige glans.
Beoefenaars kunnen overwegen om Hou Po te combineren met essentiële Qing Pi-olie als een topnoot in mengsels die gericht zijn op het afbreken van ophopingen.
-
OEM Custom Package Natuurlijke Macrocephalae Rhizoma-olie
Als effectief chemotherapeutisch middel wordt 5-fluorouracil (5-FU) veel gebruikt voor de behandeling van kwaadaardige tumoren in het maag-darmkanaal, hoofd, hals, borst en eierstokken. 5-FU is in de kliniek het eerstelijnsmedicijn voor colorectale kanker. Het werkingsmechanisme van 5-FU is het blokkeren van de transformatie van uracilnucleïnezuur naar thyminenucleïnezuur in de tumorcellen en vervolgens het beïnvloeden van de synthese en het herstel van DNA en RNA om het cytotoxische effect te bereiken (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). 5-FU veroorzaakt echter ook chemotherapie-geïnduceerde diarree (CID), een van de meest voorkomende bijwerkingen die veel patiënten treffen (Filho et al., 2016). De incidentie van diarree bij patiënten die met 5-FU werden behandeld, liep op tot 50%–80%, wat de voortgang en effectiviteit van chemotherapie ernstig beïnvloedde (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Het is daarom van groot belang om een effectieve therapie te vinden voor door 5-FU geïnduceerde chronische nierinsufficiëntie (CID).
Momenteel worden zowel medicamenteuze als niet-medicamenteuze interventies geïntegreerd in de klinische behandeling van CID. Niet-medicamenteuze interventies omvatten een gebalanceerd dieet en aanvulling met zout, suiker en andere voedingsstoffen. Geneesmiddelen zoals loperamide en octreotide worden vaak gebruikt bij de behandeling van diarree bij CID (Benson et al., 2004). Daarnaast worden in verschillende landen ook etnomedicijnen gebruikt om CID te behandelen, met hun eigen unieke therapie. Traditionele Chinese geneeskunde (TCM) is een typische etnomedicijn die al meer dan 2000 jaar wordt beoefend in Oost-Aziatische landen, waaronder China, Japan en Korea (Qi et al., 2010). TCM stelt dat chemotherapeutische geneesmiddelen Qi-verbruik, miltdeficiëntie, maagdisharmonie en endofytische vochtigheid zouden veroorzaken, wat zou resulteren in geleidingsstoornissen van de darmen. Volgens de TCM-theorie zou de behandelingsstrategie van CID voornamelijk moeten bestaan uit het aanvullen van Qi en het versterken van de milt (Wang et al., 1994).
De gedroogde wortels vanAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) enPanax ginsengCA Mey. (PG) zijn de typische kruidengeneesmiddelen in de TCM met dezelfde effecten: het aanvullen van Qi en het versterken van de milt (Li et al., 2014). AM en PG worden meestal gebruikt als kruidenpaar (de eenvoudigste vorm van Chinese kruidencompatibiliteit) met de effecten van het aanvullen van Qi en het versterken van de milt om diarree te behandelen. AM en PG werden bijvoorbeeld gedocumenteerd in klassieke antidiarreeformules zoals Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang vanTaiping Huimin Heji Ju Fang(Song-dynastie, China) en Bu Zhong Yi Qi Tang uitPi Wei Lun(Yuan-dynastie, China) (Fig. 1). Verschillende eerdere studies hebben aangetoond dat alle drie de formules CID kunnen verlichten (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Bovendien toonde onze eerdere studie aan dat Shenzhu Capsule, die alleen AM en PG bevat, potentiële effecten heeft op de behandeling van diarree, colitis (xiexiesyndroom) en andere gastro-intestinale aandoeningen (Feng et al., 2018). Er is echter geen onderzoek gedaan naar het effect en werkingsmechanisme van AM en PG bij de behandeling van CID, zowel in combinatie als afzonderlijk.
Tegenwoordig wordt de darmflora beschouwd als een potentiële factor bij het begrijpen van het therapeutische mechanisme van TCM (Feng et al., 2019). Moderne studies tonen aan dat de darmflora een cruciale rol speelt bij het handhaven van de intestinale homeostase. Een gezonde darmflora draagt bij aan de bescherming van het darmslijmvlies, de stofwisseling, de immuunhomeostase en -respons, en de onderdrukking van pathogenen (Thursby en Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Een verstoorde darmflora verstoort direct of indirect de fysiologische en immuunfuncties van het menselijk lichaam, wat leidt tot bijwerkingen zoals diarree (Patel et al., 2016; Zhao en Shen, 2010). Onderzoek heeft aangetoond dat 5-FU de structuur van de darmflora bij diarree-muizen opmerkelijk veranderde (Li et al., 2017). De effecten van ochtend- en avondmaaltijd op door 5-FU veroorzaakte diarree kunnen daarom worden gemedieerd door de darmflora. Of AM en PG alleen en in combinatie 5-FU-geïnduceerde diarree kunnen voorkomen door de darmflora te moduleren, is echter nog onbekend.
Om de antidiarree-effecten en het onderliggende mechanisme van AM en PG te onderzoeken, gebruikten we 5-FU om een diarreemodel bij muizen te simuleren. Hierbij richtten we ons op de mogelijke effecten van de enkele en gecombineerde toediening (AP) vanAtractylodes macrocephalaetherische olie (AMO) enPanax ginsengtotale saponinen (PGS), de actieve componenten respectievelijk geëxtraheerd uit AM en PG, op diarree, intestinale pathologie en microbiële structuur na 5-FU chemotherapie.
-
100% pure natuurlijke Eucommiae Foliuml olie etherische olie voor huidverzorging
Eucommia ulmoides(EU) (in het Chinees vaak “Du Zhong” genoemd) behoort tot de familie Eucommiaceae, een geslacht van de kleine boom die inheems is in Centraal-China [1Deze plant wordt in China op grote schaal gekweekt vanwege zijn medicinale belang. Er zijn ongeveer 112 verbindingen geïsoleerd uit EU, waaronder lignanen, iridoïden, fenolen, steroïden en andere verbindingen. Aanvullende kruidenformules van deze plant (zoals heerlijke thee) hebben enkele medicinale eigenschappen aangetoond. Het blad van EU heeft een hogere activiteit ten opzichte van de cortex, bloem en vrucht [2,3Er wordt gezegd dat de bladeren van EU de botsterkte en de lichaamsspieren versterken [4], wat leidt tot een langere levensduur en het bevorderen van de vruchtbaarheid bij mensen [5]. Heerlijke theeformule gemaakt van EU-bladeren zou vet verminderen en de energiestofwisseling verbeteren. Flavonoïde verbindingen (zoals rutine, chlorogeenzuur, ferulazuur en cafeïnezuur) zouden een antioxiderende werking hebben in de bladeren van EU [6].
Hoewel er voldoende literatuur bestaat over de fytochemische eigenschappen van EU, bestonden er weinig studies naar de farmacologische eigenschappen van de verschillende stoffen die uit de bast, zaden, stengels en bladeren van EU worden gewonnen. Dit reviewartikel zal gedetailleerde informatie verschaffen over de verschillende stoffen die uit de verschillende delen (bast, zaden, stengel en blad) van EU worden gewonnen en de mogelijke toepassingen van deze stoffen in gezondheidsbevorderende eigenschappen met wetenschappelijke bewijsvoering. Het zal daarmee referentiemateriaal bieden voor de toepassing van EU.
-
Pure Natural Houttuynia cordata oil Houttuynia Cordata Oil Lchthammolum Oil
In de meeste ontwikkelingslanden is 70-95% van de bevolking afhankelijk van traditionele medicijnen voor de eerstelijnsgezondheidszorg, en van hen gebruikt 85% planten of plantenextracten als actief bestanddeel.1De zoektocht naar nieuwe biologisch actieve stoffen uit planten is meestal afhankelijk van de specifieke etnische en volksinformatie die is verkregen van lokale artsen en wordt nog steeds beschouwd als een belangrijke bron voor de ontdekking van geneesmiddelen. In India zijn ongeveer 2000 geneesmiddelen van plantaardige oorsprong.2] Gezien de wijdverbreide belangstelling voor het gebruik van medicinale planten, is dit overzicht vanHouttuynia cordataThunb. biedt actuele informatie met betrekking tot botanische, commerciële, etnofarmacologische, fytochemische en farmacologische studies die in de literatuur voorkomen.H. cordataThunb. behoort tot de familieSaururaceaeen is algemeen bekend als Chinese hagedissenstaart. Het is een meerjarige kruidachtige plant met een uitlopervormige wortelstok met twee verschillende chemotypen.3,4Het Chinese chemotype van de soort wordt aangetroffen in wilde en halfwilde omstandigheden in het noordoosten van India van april tot september.5,6,7]H. cordatais verkrijgbaar in India, met name in de Brahmaputra-vallei van Assam en wordt traditioneel door verschillende stammen in Assam gebruikt in de vorm van groenten en voor verschillende medicinale doeleinden.
-
Fabrikant van 100% pure Arctium lappa-olie – Natuurlijke kalk Arctium lappa-olie met kwaliteitsborgingscertificaten
Gezondheidsvoordelen
Kliswortel wordt vaak gegeten, maar kan ook gedroogd worden en tot thee getrokken. Het is een goede bron van inuline, eenprebioticvezels die de spijsvertering bevorderen en de darmgezondheid verbeteren. Daarnaast bevat deze wortel flavonoïden (voedingsstoffen voor planten),fytochemicaliënen antioxidanten waarvan bekend is dat ze gezondheidsvoordelen hebben.
Daarnaast kan kliswortel nog andere voordelen bieden, zoals:
Verminder chronische ontstekingen Kliswortel bevat een aantal antioxidanten, zoals quercetine, fenolzuren en luteoline, die kunnen helpen uw cellen te beschermen tegenvrije radicalenDeze antioxidanten helpen ontstekingen in het hele lichaam te verminderen.
Gezondheidsrisico's
Kliswortel wordt beschouwd als veilig om te eten of als thee te drinken. Deze plant lijkt echter sterk op belladonna-nachtschadeplanten, die giftig zijn. Het is raadzaam om kliswortel alleen bij betrouwbare verkopers te kopen en het niet zelf te verzamelen. Bovendien is er weinig informatie over de effecten ervan op kinderen of zwangere vrouwen. Overleg met uw arts voordat u kliswortel gebruikt bij kinderen of als u zwanger bent.
Hier zijn enkele andere mogelijke gezondheidsrisico's waarmee u rekening moet houden bij het gebruik van kliswortel:
Verhoogde uitdroging
Kliswortel werkt als een natuurlijk diureticum, wat kan leiden tot uitdroging. Als u plaspillen of andere diuretica gebruikt, mag u geen kliswortel gebruiken. Als u deze medicijnen gebruikt, is het belangrijk om op de hoogte te zijn van andere medicijnen, kruiden en ingrediënten die kunnen leiden tot uitdroging.
Allergische reactie
Als u gevoelig bent voor madeliefjes, ambrosia of chrysanten of in het verleden allergische reacties hebt gehad, is de kans op een allergische reactie op kliswortel groter.
-
Groothandel bulkprijs 100% Pure AsariRadix Et Rhizoma olie Relax Aromatherapie Eucalyptus globulus
Dier- en in-vitrostudies hebben de potentiële antischimmel-, ontstekingsremmende en cardiovasculaire effecten van sassafras en de bestanddelen ervan onderzocht. Klinische studies ontbreken echter en sassafras wordt niet als veilig beschouwd. Safrol, het hoofdbestanddeel van de bast en olie van sassafraswortel, is verboden door de Amerikaanse Food and Drug Administration (FDA), ook voor gebruik als smaak- of geurstof, en mag niet inwendig of uitwendig worden gebruikt, omdat het mogelijk kankerverwekkend is. Safrol is gebruikt bij de illegale productie van 3,4-methyleendioxymethamfetamine (MDMA), ook bekend onder de straatnamen "ecstasy" of "Molly", en de verkoop van safrol en sassafrasolie wordt gecontroleerd door de Amerikaanse Drug Enforcement Administration.
-
Groothandelsprijs 100% Pure Stellariae Radix etherische olie (nieuw) Relax Aromatherapie Eucalyptus globulus
De Chinese Farmacopee (editie 2020) vereist dat het methanol-extract van YCH niet minder dan 20,0% mag bedragen [2], zonder dat er andere kwaliteitsindicatoren werden gespecificeerd. De resultaten van deze studie tonen aan dat de inhoud van de methanolextracten van de wilde en gekweekte monsters beide voldeden aan de farmacopee-norm, en dat er geen significant verschil tussen beide was. Er was dus geen duidelijk kwaliteitsverschil tussen wilde en gekweekte monsters, volgens die index. De inhoud van totale sterolen en totale flavonoïden in de wilde monsters was echter significant hoger dan die in de gekweekte monsters. Verdere metabolomische analyse toonde een overvloedige metabolietendiversiteit tussen de wilde en gekweekte monsters. Daarnaast werden 97 significant verschillende metabolieten uitgefilterd, die vermeld staan in deAanvullende tabel S2Tot deze significant verschillende metabolieten behoren β-sitosterol (ID is M397T42) en quercetinederivaten (M447T204_2), waarvan is gemeld dat ze actieve ingrediënten zijn. Eerder niet gerapporteerde bestanddelen, zoals trigonelline (M138T291_2), betaïne (M118T277_2), fustine (M269T36), rotenon (M241T189), arctiïne (M557T165) en logaanzuur (M399T284_2), werden ook opgenomen in de differentiële metabolieten. Deze componenten spelen verschillende rollen bij antioxidatie, ontstekingsremmende werking, het wegvangen van vrije radicalen, de bestrijding van kanker en de behandeling van atherosclerose en zouden daarom mogelijk nieuwe actieve componenten in YCH kunnen vormen. Het gehalte aan actieve ingrediënten bepaalt de werkzaamheid en kwaliteit van de geneesmiddelen [7]. Kortom, methanolextract als enige kwaliteitsevaluatie-index voor YCH heeft enkele beperkingen en er is meer onderzoek nodig naar specifieke kwaliteitsmarkers. Er waren significante verschillen in totale sterolen, totale flavonoïden en de inhoud van vele andere differentiële metabolieten tussen de wilde en gekweekte YCH; er waren dus mogelijk kwaliteitsverschillen tussen beide. Tegelijkertijd zouden de nieuw ontdekte potentiële actieve ingrediënten in YCH een belangrijke referentiewaarde kunnen vormen voor de studie van de functionele basis van YCH en de verdere ontwikkeling van YCH-bronnen.
Het belang van authentieke medicinale materialen wordt al lang erkend in de specifieke regio van herkomst voor de productie van Chinese kruidengeneesmiddelen van uitstekende kwaliteit [8]. Hoge kwaliteit is een essentieel kenmerk van echte medicinale materialen, en de habitat is een belangrijke factor die de kwaliteit van dergelijke materialen beïnvloedt. Sinds YCH als medicijn werd gebruikt, werd het lange tijd gedomineerd door wilde YCH. Na de succesvolle introductie en domesticatie van YCH in Ningxia in de jaren 80, verschoof de bron van Yinchaihu-medicinale materialen geleidelijk van wilde naar gecultiveerde YCH. Volgens een eerder onderzoek naar YCH-bronnen [9] en het veldonderzoek van onze onderzoeksgroep, zijn er aanzienlijke verschillen in de verspreidingsgebieden van de gecultiveerde en wilde medicinale materialen. De wilde YCH komt voornamelijk voor in de autonome regio Ningxia Hui in de provincie Shaanxi, grenzend aan de droge zone van Binnen-Mongolië en centraal Ningxia. Met name de woestijnsteppe in deze gebieden is de meest geschikte habitat voor de groei van YCH. Daarentegen komt de gecultiveerde YCH voornamelijk voor in het zuiden van het wilde verspreidingsgebied, zoals Tongxin County (Gecultiveerd I) en de omliggende gebieden, dat de grootste teelt- en productiebasis in China is geworden, en Pengyang County (Gecultiveerd II), dat in een zuidelijker gebied ligt en een ander productiegebied is voor gecultiveerde YCH. Bovendien zijn de habitats van de bovengenoemde twee gecultiveerde gebieden geen woestijnsteppe. Daarom zijn er, naast de productiewijze, ook aanzienlijke verschillen in de habitat van de wilde en gecultiveerde YCH. Habitat is een belangrijke factor die de kwaliteit van kruidengeneesmiddelen beïnvloedt. Verschillende habitats hebben invloed op de vorming en accumulatie van secundaire metabolieten in de planten, en daarmee op de kwaliteit van geneesmiddelen [10,11]. Daarom kunnen de significante verschillen in de inhoud van totale flavonoïden en totale sterolen en de expressie van de 53 metabolieten die we in deze studie vonden, het resultaat zijn van veldbeheer en verschillen in habitat.Een van de belangrijkste manieren waarop de omgeving de kwaliteit van medicinale materialen beïnvloedt, is door stress uit te oefenen op de bronplanten. Matige omgevingsstress stimuleert vaak de ophoping van secundaire metabolieten [12,13De groei-/differentiatiebalanshypothese stelt dat planten, wanneer er voldoende voedingsstoffen aanwezig zijn, voornamelijk groeien, terwijl planten, wanneer er een tekort is aan voedingsstoffen, zich voornamelijk differentiëren en meer secundaire metabolieten produceren [14Droogtestress veroorzaakt door watertekort is de belangrijkste milieustress voor planten in droge gebieden. In deze studie is de waterkwaliteit van de gecultiveerde YCH overvloediger, met jaarlijkse neerslagniveaus die aanzienlijk hoger liggen dan die van de wilde YCH (watervoorraad voor Gecultiveerde I was ongeveer 2 keer zo hoog als die van de wilde YCH; Gecultiveerde II was ongeveer 3,5 keer zo hoog als die van de wilde YCH). Bovendien is de bodem in de wilde omgeving zandgrond, maar de bodem op landbouwgrond kleigrond. Vergeleken met klei heeft zandgrond een slecht waterretentievermogen en is de kans groter dat droogtestress verergert. Tegelijkertijd ging het teeltproces vaak gepaard met watergift, waardoor de mate van droogtestress laag was. Wilde YCH groeit in barre, natuurlijke, droge habitats en kan daarom ernstiger droogtestress ondervinden.Osmoregulatie is een belangrijk fysiologisch mechanisme waarmee planten omgaan met droogtestress, en alkaloïden zijn belangrijke osmotische regulatoren in hogere planten [15Betaïnen zijn in water oplosbare alkaloïde quaternaire ammoniumverbindingen en kunnen als osmoprotectanten werken. Droogtestress kan het osmotische potentieel van cellen verminderen, terwijl osmoprotectanten de structuur en integriteit van biologische macromoleculen behouden en onderhouden, en effectief de schade verlichten die droogtestress aan planten veroorzaakt.16]. Zo steeg onder droogtestress het betaïnegehalte van suikerbieten en Lycium barbarum aanzienlijk [17,18Trigonelline is een regulator van de celgroei en kan onder droogtestress de celcyclus van de plant verlengen, de celgroei remmen en leiden tot krimp van het celvolume. De relatieve toename van de concentratie opgeloste stoffen in de cel stelt de plant in staat osmotische regulatie te bereiken en zijn vermogen om droogtestress te weerstaan te verbeteren [19]. JIA X [20] ontdekte dat Astragalus membranaceus (een bron van traditionele Chinese geneeskunde) bij een toename van droogtestress meer trigonelline produceerde, wat het osmotische potentieel reguleert en het vermogen om droogtestress te weerstaan verbetert. Flavonoïden blijken ook een belangrijke rol te spelen in de weerstand van planten tegen droogtestress [21,22]. Een groot aantal studies heeft bevestigd dat matige droogtestress bevorderlijk was voor de accumulatie van flavonoïden. Lang Duo-Yong et al. [23] vergeleek de effecten van droogtestress op YCH door het waterhoudend vermogen in het veld te reguleren. Er werd vastgesteld dat droogtestress de wortelgroei tot op zekere hoogte remde, maar bij matige en ernstige droogtestress (40% waterhoudend vermogen in het veld) nam het totale flavonoïdegehalte in YCH toe. Ondertussen kunnen fytosterolen onder droogtestress de vloeibaarheid en permeabiliteit van celmembranen reguleren, waterverlies remmen en de stressbestendigheid verbeteren [24,25]. Daarom zou de toegenomen accumulatie van totale flavonoïden, totale sterolen, betaïne, trigonelline en andere secundaire metabolieten in wilde YCH verband kunnen houden met intensieve droogtestress.In deze studie werd een KEGG-padverrijkingsanalyse uitgevoerd op de metabolieten waarvan werd vastgesteld dat ze significant verschilden tussen de wilde en gekweekte YCH. De verrijkte metabolieten omvatten die welke betrokken zijn bij de routes van ascorbaat- en aldaraatmetabolisme, aminoacyl-tRNA-biosynthese, histidinemetabolisme en bèta-alaninemetabolisme. Deze metabole routes zijn nauw verwant aan de stressbestendigheidsmechanismen van planten. Het ascorbaatmetabolisme speelt een belangrijke rol in de antioxidantproductie, het koolstof- en stikstofmetabolisme, stressbestendigheid en andere fysiologische functies van planten [26]; aminoacyl-tRNA-biosynthese is een belangrijk pad voor de vorming van eiwitten [27,28], dat betrokken is bij de synthese van stressbestendige eiwitten. Zowel histidine- als β-alanine-routes kunnen de tolerantie van planten voor omgevingsstress verbeteren [29,30Dit geeft verder aan dat de verschillen in metabolieten tussen de wilde en gekweekte YCH nauw verband hielden met de processen van stressbestendigheid.Bodem is de materiële basis voor de groei en ontwikkeling van medicinale planten. Stikstof (N), fosfor (P) en kalium (K) in de bodem zijn belangrijke voedingsstoffen voor de groei en ontwikkeling van planten. Organische stof in de bodem bevat ook N, P, K, Zn, Ca, Mg en andere macro- en sporenelementen die nodig zijn voor medicinale planten. Een overmaat aan of tekort aan voedingsstoffen, of een onevenwichtige voedingsstofverhouding, heeft invloed op de groei en ontwikkeling en de kwaliteit van medicinale materialen, en verschillende planten hebben verschillende voedingsbehoeften.31,32,33]. Een lage stikstofstress bevorderde bijvoorbeeld de synthese van alkaloïden in Isatis indigotica en was gunstig voor de accumulatie van flavonoïden in planten zoals Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge en Dichondra repens Forst. Daarentegen remde te veel stikstof de accumulatie van flavonoïden in soorten zoals Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis en Ginkgo biloba en beïnvloedde het de kwaliteit van medicinale materialen.34]. De toepassing van P-meststof was effectief in het verhogen van het gehalte aan glycyrrhizinezuur en dihydroaceton in Oeral-zoethout [35]. Toen de toegepaste hoeveelheid 0,12 kg·m−2 overschreed, daalde het totale flavonoïdegehalte in Tussilago farfara [36]. De toepassing van een P-meststof had een negatief effect op het gehalte aan polysacchariden in de traditionele Chinese geneeskrachtige rhizoma polygonati [37], maar een K-meststof was effectief in het verhogen van het saponinengehalte [38Het toepassen van 450 kg·hm−2 K meststof was het beste voor de groei en de saponine-accumulatie van twee jaar oude Panax notoginseng [39]. Bij een verhouding van N:P:K = 2:2:1 waren de totale hoeveelheden hydrothermaal extract, harpagide en harpagoside het hoogst [40De hoge verhouding van N, P en K was gunstig voor de groei van Pogostemon cablin en verhoogde het gehalte aan vluchtige olie. Een lage verhouding van N, P en K verhoogde het gehalte aan de belangrijkste effectieve componenten van Pogostemon cablin stengelbladolie [41]. YCH is een plant die goed tegen onvruchtbare grond kan en mogelijk specifieke behoeften heeft aan voedingsstoffen zoals N, P en K. In deze studie was de bodem van de wilde YCH-planten, vergeleken met de gecultiveerde YCH, relatief onvruchtbaar: de hoeveelheid organische stof, totale N, totale P en totale K in de bodem was respectievelijk ongeveer 1/10, 1/2, 1/3 en 1/3 van die van de gecultiveerde planten. De verschillen in bodemvoedingsstoffen zouden daarom een andere reden kunnen zijn voor de verschillen tussen de metabolieten die in de gecultiveerde en wilde YCH zijn aangetroffen. Weibao Ma et al. [42] ontdekten dat de toediening van een bepaalde hoeveelheid N-meststof en P-meststof de opbrengst en kwaliteit van zaden aanzienlijk verbeterde. Het effect van voedingselementen op de kwaliteit van YCH is echter onduidelijk en bemestingsmaatregelen om de kwaliteit van medicinale materialen te verbeteren, moeten verder worden onderzocht.Chinese kruidengeneesmiddelen hebben de volgende kenmerken: “Gunstige habitats bevorderen de opbrengst, en ongunstige habitats verbeteren de kwaliteit” [43Tijdens de geleidelijke overgang van wilde naar gecultiveerde YCH veranderde de habitat van de planten van de droge en kale woestijnsteppe naar vruchtbare landbouwgrond met overvloediger water. De habitat van de gecultiveerde YCH is superieur en de opbrengst is hoger, wat bijdraagt aan de vraag van de markt. Deze superieure habitat leidde echter tot aanzienlijke veranderingen in de metabolieten van YCH; of dit bevorderlijk is voor de kwaliteit van YCH en hoe een hoogwaardige productie van YCH kan worden bereikt met behulp van wetenschappelijk onderbouwde teeltmaatregelen, vereist verder onderzoek.Simulatieve habitatcultivatie is een methode om de habitat en de omgevingsomstandigheden van wilde medicinale planten te simuleren, gebaseerd op kennis van de langetermijnaanpassing van de planten aan specifieke omgevingsstressoren [43Door verschillende omgevingsfactoren te simuleren die van invloed zijn op wilde planten, met name de oorspronkelijke habitat van planten die worden gebruikt als bron van authentieke medicinale materialen, maakt de aanpak gebruik van wetenschappelijk ontwerp en innovatieve menselijke interventie om de groei en het secundaire metabolisme van Chinese medicinale planten in evenwicht te brengen [43]. De methode is gericht op het bereiken van optimale omstandigheden voor de ontwikkeling van hoogwaardige medicinale materialen. Simulatieve habitatcultivatie zou een effectieve manier moeten bieden voor de hoogwaardige productie van YCH, zelfs wanneer de farmacodynamische basis, kwaliteitsmarkers en responsmechanismen op omgevingsfactoren onduidelijk zijn. Daarom stellen we voor dat wetenschappelijke ontwerp- en veldbeheermaatregelen voor de teelt en productie van YCH worden uitgevoerd met inachtneming van de omgevingskenmerken van wilde YCH, zoals droge, onvruchtbare en zanderige bodemomstandigheden. Tegelijkertijd hopen we dat onderzoekers diepgaander onderzoek zullen doen naar de functionele materiaalbasis en kwaliteitsmarkers van YCH. Deze studies kunnen effectievere evaluatiecriteria voor YCH opleveren en de hoogwaardige productie en duurzame ontwikkeling van de industrie bevorderen. -
Herbal Fructus Amomi olie Natuurlijke massage Diffusers 1kg Bulk Amomum villosum Essentiële olie
De familie Zingiberaceae krijgt steeds meer aandacht in allelopathisch onderzoek vanwege de rijke, vluchtige oliën en de aromatische eigenschappen van haar leden. Eerder onderzoek had aangetoond dat de chemicaliën uit Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] en Zingiber officinale Rosc. [42] van de gemberfamilie hebben allelopathische effecten op zaadkieming en zaailinggroei van maïs, sla en tomaat. Onze huidige studie is het eerste rapport over de allelopathische activiteit van vluchtige stoffen uit stengels, bladeren en jonge vruchten van A. villosum (een lid van de familie Zingiberaceae). De olieopbrengst van stengels, bladeren en jonge vruchten was respectievelijk 0,15%, 0,40% en 0,50%, wat aangeeft dat vruchten een grotere hoeveelheid vluchtige oliën produceerden dan stengels en bladeren. De belangrijkste componenten van vluchtige oliën uit stengels waren β-pineen, β-fellandreen en α-pineen, wat een patroon was dat vergelijkbaar was met dat van de belangrijkste chemicaliën in bladolie, β-pineen en α-pineen (monoterpeenkoolwaterstoffen). Aan de andere kant was de olie in jonge vruchten rijk aan bornylacetaat en kamfer (geoxygeneerde monoterpenen). De resultaten werden ondersteund door de bevindingen van Do N Dai [30,32] en Hui Ao [31] die de oliën uit verschillende organen van A. villosum had geïdentificeerd.
Er zijn verschillende rapporten over de remmende werking van deze hoofdbestanddelen op de plantengroei bij andere soorten. Shalinder Kaur ontdekte dat α-pineen uit eucalyptus de wortellengte en scheuthoogte van Amaranthus viridis L. aanzienlijk onderdrukte bij een concentratie van 1,0 μL [43], en een ander onderzoek toonde aan dat α-pineen de vroege wortelgroei remde en oxidatieve schade aan het wortelweefsel veroorzaakte door een verhoogde productie van reactieve zuurstofsoorten [44]. In sommige rapporten is betoogd dat β-pineen de kieming en de groei van zaailingen van onkruidsoorten op een dosisafhankelijke manier remt door de integriteit van het membraan te verstoren [45], waardoor de biochemie van planten verandert en de activiteit van peroxidasen en polyfenoloxidasen wordt verbeterd [46]. β-fellandreen vertoonde maximale remming van de kieming en groei van Vigna unguiculata (L.) Walp bij een concentratie van 600 ppm [47], terwijl kamfer bij een concentratie van 250 mg/m3 de groei van wortel en scheut van Lepidium sativum L. onderdrukte. [48]. Onderzoek naar het allelopathische effect van bornylacetaat is echter schaars. In onze studie waren de allelopathische effecten van β-pineen, bornylacetaat en kamfer op de wortellengte zwakker dan die van de vluchtige oliën, met uitzondering van α-pineen, terwijl bladolie, rijk aan α-pineen, ook fytotoxischer was dan de overeenkomstige vluchtige oliën uit de stengels en vruchten van A. villosum. Beide bevindingen wijzen erop dat α-pineen mogelijk de belangrijkste chemische stof is voor allelopathie bij deze soort. Tegelijkertijd impliceerden de resultaten ook dat sommige verbindingen in de fruitolie die niet overvloedig aanwezig waren, zouden kunnen bijdragen aan het fytotoxische effect, een bevinding die in de toekomst verder onderzoek behoeft.Onder normale omstandigheden is het allelopathische effect van allelochemicaliën soortspecifiek. Jiang et al. ontdekten dat etherische olie geproduceerd door Artemisia sieversiana een krachtiger effect had op Amaranthus retroflexus L. dan op Medicago sativa L., Poa annua L. en Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng.49]. In een ander onderzoek veroorzaakte de vluchtige olie van Lavandula angustifolia Mill. verschillende gradaties van fytotoxische effecten op verschillende plantensoorten. Lolium multiflorum Lam. was de meest gevoelige acceptorsoort; de hypocotyl- en kiemwortelgroei werden met respectievelijk 87,8% en 76,7% geremd bij een dosis van 1 μl/ml olie, maar de hypocotylgroei van komkommerzaailingen werd nauwelijks beïnvloed [20Uit onze resultaten bleek ook dat er een verschil was in gevoeligheid voor A. villosum volatiles tussen L. sativa en L. perenne.De vluchtige stoffen en etherische oliën van dezelfde soort kunnen kwantitatief en/of kwalitatief variëren vanwege groeiomstandigheden, plantendelen en detectiemethoden. Zo toonde een rapport aan dat pyranoïde (10,3%) en β-caryofylleen (6,6%) de belangrijkste bestanddelen waren van de vluchtige stoffen die uit de bladeren van Sambucus nigra werden uitgestoten, terwijl benzaldehyde (17,8%), α-bulneseen (16,6%) en tetracosaan (11,5%) overvloedig aanwezig waren in de oliën die uit de bladeren werden geëxtraheerd [50In ons onderzoek hadden de vluchtige stoffen die vrijkwamen uit het verse plantenmateriaal een sterker allelopathisch effect op de testplanten dan de geëxtraheerde vluchtige oliën. De verschillen in respons bleken nauw verband te houden met de verschillen in de allelochemicaliën in de twee preparaten. De exacte verschillen tussen vluchtige stoffen en oliën moeten in vervolgexperimenten verder worden onderzocht.Verschillen in microbiële diversiteit en microbiële gemeenschapsstructuur in bodemmonsters waaraan vluchtige oliën waren toegevoegd, hielden verband met de concurrentie tussen micro-organismen, evenals met eventuele toxische effecten en de duur van de vluchtige oliën in de bodem. Vokou en Liotiri [51] vonden dat de respectievelijke toepassing van vier essentiële oliën (0,1 ml) op gecultiveerde grond (150 g) de ademhaling van de bodemmonsters activeerde, zelfs de oliën verschilden in hun chemische samenstelling, wat suggereert dat plantaardige oliën worden gebruikt als koolstof- en energiebron door aanwezige bodemmicro-organismen. Gegevens verkregen uit de huidige studie bevestigden dat de oliën van de hele plant van A. villosum bijdroegen aan de duidelijke toename van het aantal soorten bodemschimmels op de 14e dag na toevoeging van de olie, wat aangeeft dat de olie mogelijk de koolstofbron voor meer bodemschimmels vormt. Een andere studie rapporteerde een bevinding: bodemmicro-organismen herwonnen hun oorspronkelijke functie en biomassa na een tijdelijke periode van variatie veroorzaakt door de toevoeging van Thymbra capitata L. (Cav)-olie, maar de olie in de hoogste dosis (0,93 µl olie per gram bodem) stond bodemmicro-organismen niet toe hun oorspronkelijke functionaliteit te herstellen [52]. In de huidige studie, gebaseerd op de microbiologische analyse van de bodem na behandeling met verschillende dagen en concentraties, speculeerden we dat de bacteriële gemeenschap in de bodem zich na meer dagen zou herstellen. De schimmelmicrobiota daarentegen kan niet terugkeren naar zijn oorspronkelijke staat. De volgende resultaten bevestigen deze hypothese: het duidelijke effect van een hoge concentratie olie op de samenstelling van het schimmelmicrobioom in de bodem werd onthuld door middel van principal coordinates analysis (PCoA), en de heatmap-presentaties bevestigden opnieuw dat de samenstelling van de schimmelgemeenschap in de bodem behandeld met 3,0 mg/ml olie (namelijk 0,375 mg olie per gram bodem) op genusniveau aanzienlijk verschilde van de andere behandelingen. Momenteel is er nog maar weinig onderzoek gedaan naar de effecten van de toevoeging van monoterpeenkoolwaterstoffen of zuurstofhoudende monoterpenen op de microbiële diversiteit en gemeenschapsstructuur in de bodem. Uit een paar onderzoeken is gebleken dat α-pineen de microbiële activiteit in de bodem en de relatieve overvloed van Methylophilaceae (een groep methylotrofen, Proteobacteria) bij een laag vochtgehalte vergroot, en een belangrijke rol speelt als koolstofbron in drogere bodems [53]. Op dezelfde manier bevat de vluchtige olie van de hele A. villosum-plant 15,03% α-pineen (Aanvullende tabel S1), zorgde duidelijk voor een toename van de relatieve hoeveelheid Proteobacteria bij 1,5 mg/ml en 3,0 mg/ml, wat erop duidde dat α-pineen mogelijk fungeert als een van de koolstofbronnen voor bodemmicro-organismen.De vluchtige stoffen die door verschillende organen van A. villosum worden geproduceerd, hadden verschillende gradaties van allelopathische effecten op L. sativa en L. perenne, wat nauw verwant was aan de chemische bestanddelen die plantendelen van A. villosum bevatten. Hoewel de chemische samenstelling van de vluchtige olie is bevestigd, zijn de vluchtige stoffen die A. villosum bij kamertemperatuur afgeeft onbekend. Dit vereist nader onderzoek. Bovendien is het synergetische effect tussen verschillende allelochemicaliën ook het overwegen waard. Wat betreft bodemmicro-organismen: om het effect van de vluchtige olie op bodemmicro-organismen uitgebreid te onderzoeken, moeten we nog diepgaander onderzoek doen: de behandelingstijd van de vluchtige olie verlengen en variaties in de chemische samenstelling van de vluchtige olie in de bodem op verschillende dagen vaststellen. -
Zuivere Artemisia capillaris olie voor het maken van kaarsen en zeep, groothandel diffuser essentiële olie nieuw voor rietbranders
Ontwerp van knaagdiermodellen
De dieren werden willekeurig verdeeld in vijf groepen van elk vijftien muizen. De controlegroep en de modelgroep kregen maagsondes.sesamolieGedurende 6 dagen. Muizen in de positieve controlegroep kregen gedurende 6 dagen bifendaattabletten (BT, 10 mg/kg) via een sonde toegediend. De experimentele groepen werden gedurende 6 dagen behandeld met 100 mg/kg en 50 mg/kg AEO opgelost in sesamolie. Op dag 6 werd de controlegroep behandeld met sesamolie en alle andere groepen werden behandeld met een enkele dosis van 0,2% CCl4 in sesamolie (10 ml/kg).intraperitoneale injectieDe muizen werden vervolgens zonder water vastgehouden en er werden bloedmonsters verzameld uit de retrobulbaire vaten; het verzamelde bloed werd gecentrifugeerd op 3000 ×ggedurende 10 min om het serum te scheiden.Cervicale ontwrichtingwerd direct na de bloedafname uitgevoerd en de levermonsters werden onmiddellijk verwijderd. Een deel van het levermonster werd onmiddellijk bewaard bij -20 °C tot analyse, en een ander deel werd verwijderd en gefixeerd in een 10%-container.formalineoplossing; de resterende weefsels werden bewaard bij -80 °C voor histopathologische analyse (Wang et al., 2008,Hsu et al., 2009,Nie et al., 2015).
Meting van de biochemische parameters in het serum
Leverschade werd beoordeeld door deenzymatische activiteitenvan serum ALT en AST met behulp van de bijbehorende commerciële kits en volgens de instructies van de kits (Nanjing, provincie Jiangsu, China). De enzymatische activiteit werd uitgedrukt in eenheden per liter (U/l).
Meting van MDA, SOD, GSH en GSH-Pxin leverhomogenaten
Leverweefsels werden gehomogeniseerd met koude fysiologische zoutoplossing in een verhouding van 1:9 (g/v, lever:zoutoplossing). De homogenaten werden gecentrifugeerd (2500 ×g(10 min) om de supernatanten te verzamelen voor de daaropvolgende bepalingen. Leverschade werd beoordeeld aan de hand van de levermetingen van de MDA- en GSH-waarden, evenals de SOD- en GSH-P-waarden.xActiviteiten. Al deze werden bepaald volgens de instructies op de kit (Nanjing, provincie Jiangsu, China). De resultaten voor MDA en GSH werden uitgedrukt als nmol per mg eiwit (nmol/mg prot), en de activiteiten van SOD en GSH-Pxwerden uitgedrukt als U per mg eiwit (U/mg prot).
Histopathologische analyse
Delen van vers verkregen lever werden gefixeerd in een 10% gebufferdeparaformaldehydefosfaatoplossing. Het monster werd vervolgens ingebed in paraffine, in plakjes van 3-5 μm gesneden en gekleurd methematoxylineEneosine(H&E) volgens een standaardprocedure, en uiteindelijk geanalyseerd doorlichtmicroscopie(Tian et al., 2012).
Statistische analyse
De resultaten werden weergegeven als gemiddelde ± standaarddeviatie (SD). De resultaten werden geanalyseerd met het statistische programma SPSS Statistics, versie 19.0. De gegevens werden onderworpen aan een variantieanalyse (ANOVA).p< 0,05) gevolgd door Dunnett's test en Dunnett's T3-test om de statistisch significante verschillen tussen de waarden van verschillende experimentele groepen te bepalen. Een significant verschil werd beschouwd op een niveau vanp< 0,05.
Resultaten en discussie
Bestanddelen van AEO
Bij GC/MS-analyse werd vastgesteld dat de AEO 25 bestanddelen bevatte, die werden geëlueerd tussen 10 en 35 minuten, en er werden 21 bestanddelen geïdentificeerd die 84% van de essentiële olie uitmaken (Tabel 1). De vluchtige olie bevattemonoterpenoïden(80,9%), sesquiterpenoïden (9,5%), verzadigde onvertakte koolwaterstoffen (4,86%) en gemengd acetyleen (4,86%). Vergeleken met andere studies (Guo et al., 2004), vonden we overvloedige monoterpenoïden (80,90%) in de AEO. De resultaten toonden aan dat het meest voorkomende bestanddeel van AEO β-citronellol is (16,23%). Andere belangrijke componenten van AEO zijn 1,8-cineol (13,9%).kamfer(12,59%),linalool(11,33%), α-pineen (7,21%), β-pineen (3,99%),thymol(3,22%), enmyrceen(2,02%). De variatie in de chemische samenstelling kan verband houden met de omgevingsomstandigheden waaraan de plant werd blootgesteld, zoals mineraalwater, zonlicht, het ontwikkelingsstadium envoeding.
-
Pure Saposhnikovia divaricata-olie voor het maken van kaarsen en zeep, groothandel in diffusers, nieuwe etherische olie voor rietbranders
2.1. Voorbereiding van SDE
De wortelstokken van SD werden als gedroogd kruid gekocht bij Hanherb Co. (Guri, Korea). De plantenmaterialen werden taxonomisch bevestigd door Dr. Go-Ya Choi van het Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). Een proefexemplaar (nummer 2014 SDE-6) werd gedeponeerd in het Korean Herbarium of Standard Herbal Resources. Gedroogde wortelstokken van SD (320 g) werden tweemaal geëxtraheerd met 70% ethanol (met een refluxtijd van 2 uur) en het extract werd vervolgens geconcentreerd onder verminderde druk. Het afkooksel werd gefiltreerd, gevriesdroogd en bewaard bij 4 °C. De opbrengst aan gedroogd extract uit ruwe grondstoffen was 48,13% (w/w).
2.2. Kwantitatieve hogeprestatievloeistofchromatografie (HPLC)-analyse
Chromatografische analyse werd uitgevoerd met een HPLC-systeem (Waters Co., Milford, MA, VS) en een fotodiode-arraydetector. Voor de HPLC-analyse van SDE werd de primaireO-glucosylcimifugin standaard werd gekocht van het Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea), ensec-O-glucosylhamaudol en 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol werden in ons laboratorium geïsoleerd en geïdentificeerd door middel van spectrale analyses, voornamelijk door middel van NMR en MS.
SDE-monsters (0,1 mg) werden opgelost in 70% ethanol (10 ml). Chromatografische scheiding werd uitgevoerd met een XSelect HSS T3 C18-kolom (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, VS). De mobiele fase bestond uit acetonitril (A) en 0,1% azijnzuur in water (B) met een stroomsnelheid van 1,0 ml/min. Er werd een meerstapsgradiëntprogramma gebruikt, als volgt: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min) en 20-65% A (23-40 min). De detectiegolflengte werd gescand op 210-400 nm en geregistreerd op 254 nm. Het injectievolume was 10,0μL. Standaardoplossingen voor de bepaling van drie chromonen werden bereid in een uiteindelijke concentratie van 7,781 mg/ml (primairO-glucosylcimifugin), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol) en 31,125 mg/ml (sec-O-glucosylhamaudol) in methanol en bewaard bij 4°C.
2.3. Evaluatie van de ontstekingsremmende activiteitIn vitro
2.3.1. Celkweek en monsterbehandeling
RAW 264.7-cellen werden verkregen van de American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, VS) en gekweekt in DMEM-medium met 1% antibiotica en 5,5% FBS. De cellen werden geïncubeerd in een vochtige atmosfeer met 5% CO2 bij 37 °C. Om de cellen te stimuleren, werd het medium vervangen door vers DMEM-medium en lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, VS) bij 1μg/ml werd toegevoegd in aanwezigheid of afwezigheid van SDE (200 of 400μg/mL) gedurende nog eens 24 uur.
2.3.2. Bepaling van stikstofoxide (NO), prostaglandine E2 (PGE2), tumornecrosefactor-α(TNF-α), en de productie van interleukine-6 (IL-6)
Cellen werden behandeld met SDE en gestimuleerd met LPS gedurende 24 uur. De NO-productie werd geanalyseerd door nitriet te meten met behulp van het Griess-reagens volgens een eerder onderzoek [12]. Secretie van de ontstekingscytokinen PGE2, TNF-α, en IL-6 werd bepaald met een ELISA-kit (R&D-systemen) volgens de instructies van de fabrikant. De effecten van SDE op de NO- en cytokineproductie werden bepaald bij 540 nm of 450 nm met behulp van een Wallac EnVision.™microplate-lezer (PerkinElmer).
2.4. Evaluatie van de anti-osteoartritisactiviteitIn vivo
2.4.1. Dieren
Mannelijke Sprague-Dawley-ratten (7 weken oud) werden gekocht van Samtako Inc. (Osan, Korea) en gehuisvest onder gecontroleerde omstandigheden met een licht/donkercyclus van 12 uur.°C en% vochtigheid. Ratten kregen een laboratoriumdieet en waternaar eigen goeddunkenAlle experimentele procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de National Institutes of Health (NIH) en goedgekeurd door de Animal Care and Use Committee van de Universiteit van Daejeon (Daejeon, Republiek Korea).
2.4.2. Inductie van OA met MIA bij ratten
De dieren werden gerandomiseerd en toegewezen aan behandelingsgroepen vóór aanvang van het onderzoek (per groep). MIA-oplossing (3 mg/50μEen 0,9% zoutoplossing werd direct in de intra-articulaire ruimte van de rechterknie geïnjecteerd onder anesthesie geïnduceerd met een mengsel van ketamine en xylazine. Ratten werden willekeurig verdeeld in vier groepen: (1) de zoutoplossinggroep zonder MIA-injectie, (2) de MIA-groep met MIA-injectie, (3) de met SDE behandelde groep (200 mg/kg) met MIA-injectie, en (4) de met indomethacine (IM) behandelde groep (2 mg/kg) met MIA-injectie. Ratten kregen oraal SDE en IM toegediend 1 week vóór de MIA-injectie gedurende 4 weken. De dosering van SDE en IM die in deze studie werd gebruikt, was gebaseerd op die welke in eerdere studies werd gebruikt [10,13,14].
2.4.3. Metingen van de achterpootgewichtverdeling
Na de inductie van OA was de oorspronkelijke balans in het draagvermogen van de achterpoten verstoord. Een incapacitantietester (Linton Instrumentation, Norfolk, VK) werd gebruikt om veranderingen in de draagkracht te evalueren. Ratten werden voorzichtig in de meetkamer geplaatst. De door de achterpoot uitgeoefende draagkracht werd gemiddeld over een periode van 3 seconden. De gewichtsverdelingsverhouding werd berekend met de volgende vergelijking: [gewicht op rechterachterpoot / (gewicht op rechterachterpoot + gewicht op linkerachterpoot)] × 100 [15].
2.4.4. Metingen van serumcytokineniveaus
De bloedmonsters werden 10 minuten gecentrifugeerd bij 1500 g en 4 °C; vervolgens werd het serum verzameld en bewaard bij -70 °C tot gebruik. De IL-1-niveausβ, IL-6, TNF-αen PGE2 in het serum werden gemeten met behulp van ELISA-kits van R&D Systems (Minneapolis, MN, VS) volgens de instructies van de fabrikant.
2.4.5. Real-time kwantitatieve RT-PCR-analyse
Totaal RNA werd geëxtraheerd uit kniegewrichtsweefsel met behulp van TRI Reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, VS), omgezet in cDNA en PCR-geamplificeerd met behulp van een TM One Step RT PCR-kit met SYBR Green (Applied Biosystems, Grand Island, NY, VS). Real-time kwantitatieve PCR werd uitgevoerd met behulp van het Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-systeem (Applied Biosystems, Grand Island, NY, VS). De primersequenties en de probesequentie worden weergegeven in tabel 1.1Aliquots van monster-cDNA's en een gelijke hoeveelheid GAPDH-cDNA werden geamplificeerd met het TaqMan® Universal PCR-mastermengsel met DNA-polymerase volgens de instructies van de fabrikant (Applied Biosystems, Foster, CA, VS). De PCR-omstandigheden waren 2 minuten bij 50 °C, 10 minuten bij 94 °C, 15 seconden bij 95 °C en 1 minuut bij 60 °C gedurende 40 cycli. De concentratie van het doelgen werd bepaald met behulp van de vergelijkende Ct-methode (drempelcyclusnummer op het kruispunt tussen amplificatieplot en drempelwaarde), volgens de instructies van de fabrikant.
